Gene / Sub Cloning

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Gene/Sub cloning Q & A

Gene/Sub cloning 기간은 얼마나 걸리나요?

예상 소요기간은 약 3~4주이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다

어떤 시료를 제공해야 하나요?

Vector plasmid와 insert template를 제공해 주셔야 합니다.
1) Plasmid DNA: 100 ng/ul (1 ug 이상)
2) cDNA, genomic DNA(gDNA): cDNA synthesis 혹은 gDNA extraction한 시료 20 ul 이상(농도 표기)
3) PCR product: 전기영동으로 DNA band가 확인된 PCR product 20 ul 이상(농도 표기)

주로 사용하는 항생제가 아닌 vector도 클로닝이 가능한가요?

Amplicillin, Kanamycin이외의 항생제 저항성을 가지는 plasmid의 경우, 시료를 보내주실 때, 항생제도 함께 제공해 주시면 클로닝이 가능합니다.

납품되는 양은 얼마나 되나요?

Cloned DNA plasmid 3ug을 보내드립니다. (예외, Low copy plasmid)

완료 샘플은 얼마나 보관되나요?

클로닝에 사용된 vector, insert DNA는 완료 후 고객에게 모두 납품되며, 완료된 plasmid는 출고일로부터 3개월간 보관된 후 일괄 폐기됩니다.

E.coli stock을 받을 수 있나요?

유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 통합고시에 따라 납품 받을 곳의 LMO 시설 번호를 알려주시면 E.coli stock 서비스를 통해 E.coli stock을 제공이 가능합니다.

Mutagenesis Q & A

Mutagenesis는 얼마나 걸리나요?

Site-directed mutagenesis의 경우, 2~3주이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다. Overlap PCR클로닝 방법으로 mutagenesis가 진행될 경우, 예상 소요기간은 약 4주이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다.

어떤 시료를 제공해야 하나요?

Vector plasmid를 아래의 농도로 제공해 주셔야 합니다. Plasmid DNA: 100 ng/ul (1 ug 이상)

납품되는 양은 얼마나 되나요?

Cloned DNA plasmid 3ug을 보내드립니다. (예외, Low copy plasmid)

완료 샘플은 얼마나 보관되나요?

클로닝에 사용된 vector, insert DNA는 완료 후 고객에게 모두 납품되며, 완료된 plasmid는 출고일로부터 3개월간 보관된 후 일괄 폐기됩니다.

TA cloning Q & A

TA cloning은 얼마나 걸리나요?

예상 소요기간은 약 1~2주이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다.

어떤 시료를 제공해야 하나요?

PCR product를 아래 양으로 제공해 주셔야 합니다. 전기영동으로 DNA band가 확인된 PCR product 20 ul 이상(농도 표기)

TA cloning 된 plasmid를 납품 받을 수 있나요?

네, 별도로 요청하시면 Cloned DNA plasmid 3ug을 보내드립니다.

MAXI/GIGA prep Q & A

MAXI/GIGA prep은 얼마나 걸리나요?

MAXI prep의 예상 소요기간은 약 1주이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다. GIGA prep의 예상 소요기간은 약 2주이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다.

어떤 시료를 제공해야 하나요?

Plasmid 100 ng/ul (1 ug 이상)로 제공해 주셔야 합니다.

주로 사용하는 항생제가 아닌 vector도 클로닝이 가능한가요?

Amplicillin, Kanamycin이외의 항생제 저항성을 가지는 plasmid의 경우, 시료를 보내주실 때, 항생제도 함께 제공해 주시면 Prep 서비스 이용이 가능합니다.

완료 샘플은 얼마나 보관되나요?

완료된 plasmid는 출고일로부터 3개월간 보관된 후 일괄 폐기됩니다.

E.coli stock을 받을 수 있나요?

유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 통합고시에 따라 납품 받을 곳의 LMO 시설 번호를 알려주시면 E.coli stock 서비스를 통해 E.coli stock을 제공이 가능합니다.

IVT Q & A

IVT는 얼마나 걸리나요?

예상 소요기간은 Working day 기준 7~10일이며, 예상치 못한 문제 발생시 기간이 연장될 수 있습니다.

어떤 시료를 제공해야 하나요?

Plasmid의 경우, CDS 5’ region에 T7 promoter 서열이 있는 plasmid여야 하며 100 ng/ul (1 ug 이상) 제공해주셔야 합니다.

완료 샘플은 얼마나 보관되나요?

클로닝에 사용된 vector, insert DNA는 완료 후 고객에게 모두 납품되며, 완료된 plasmid는 출고일로부터 3개월간 보관된 후 일괄 폐기됩니다.

몇 kb까지 RNA 합성이 가능한가요?

일반적으로는 0.1 kb~ 2 kb까지 가능하며, 0.1 kb 미만일 경우 제공량(30 ug)을 보장해드리기 어렵습니다. 또한, 2 kb 이상일 경우 기간이 연장될 수 있습니다.

합성된 RNA를 사용하여 translation 가능한가요?

5' capping과 3' polyA modification을 하시면 가능합니다. 단, 현재 당사에서는 5' capping과 3' polyA modification 서비스는 제공하고 있지 않습니다.

. RNA 합성하려는 유전자 앞에 T7, SP6, T3 promoter가 없을 경우에도 가능한가요?

네, 가능합니다. RNA 합성할 유전자를 T7 promoter서열이 포함된 forward primer와 target gene의 reverse primer를 사용하여 PCR 진행 후 IVT를 통해 RNA 합성이 가능합니다. 가능성이 극히 낮으나, PCR로 인한 mutation이 발생할 수도 있다는 점 참고해 주시기 바랍니다.

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